Temario
Objetivos
En los últimos años, la citometría de flujo se ha convertido en una compleja y poderosa herramienta para el análisis celular, esencial en numerosos aspectos de interés para la I+D+I en Biología Celular y Molecular, Biotecnología, Descubrimiento de Fármacos y Toxicología, Estudios Medioambientales, además de sus claramente establecidas aplicaciones clínicas en el diagnóstico y pronóstico onco-hematológico e inmunológico.
El conocimiento de los principios básicos de las técnicas citométricas y la familiarización del usuario con los puntos críticos de su aplicación práctica, son esenciales para un correcto uso de la citometría en el contexto básico y clínico. A pesar de ello, no existen en la actualidad iniciativas sistemáticas e integradas de formación orientada a conferir a los usuarios de citometría la capacitación suficiente para conocer y manejar adecuadamente los instrumentos, para diseñar y optimizar los experimentos citométricos y para manejar e interpretar correctamente los resultados obtenidos.
En el presente Curso de Especialización, y a través de lecciones teóricas no presenciales (equivalentes a 3 créditos ECTS) y sesiones presenciales prácticas (equivalentes a 3 créditos ECTS), se abordarán los aspectos básicos de la citometría de flujo y de las metodologías más relevantes del análisis por citometría de flujo. Se hará hincapié en los principios técnicos de la citometría de flujo y el manejo de los instrumentos, los fundamentos de las principales aplicaciones, los aspectos esenciales del análisis de datos y la interpretación de los resultados y los procedimientos de control de calidad en las aplicaciones básicas de la citometría de flujo.
Requisitos de acceso
Diplomatura, Grado o Licenciatura. Relación profesional con la citometria de flujo
Temario
1. FUNDAMENTOS Y APLICACIONES DE LA CITOMETRÍA DE FLUJO: Bases técnicas de la citometría de flujo. Componentes, sistemas y funcionamiento del citómetro de flujo. Fluorescencia y marcadores fluorescentes. Panorámica de aplicacions generales de la citometria de flujo. Avances en citometría y citómica.
2. DISEÑO Y OPTIMIZACIÓN DE EXPERIMENTOS-FASE PREANALÍTICA: Preparación de muestras. Selección de reactivos. Diseño de protocolos y paneles especializados. Recursos de citometría en Internet.
3. DISEÑO Y OPTIMIZACIÓN DE EXPERIMENTOS-FASE ANALÍTICA: Adquisición de datos con software propio del citómetro. Selección de poblaciones. Compensación de fluorescencia. Ensayos cinéticos (citometría en tiempo real).
4.MANEJO DE LOS CITÓMETROS DE FLUJO: Conexión y desconexión del citómetro. Limpieza y mantenimiento del citómetro. Autoestandarización y control de calidad. Procedimientos de seguridad.
5.CITOMETRÍA PRÁCTICA-EJEMPLOS DE APLICACIONES EN BIOMEDICINA: Detección de la expresión celular de proteínas fluorescentes. Identificación de poblaciones celulares específicas: Inmunofenotipo.
Detección de proteínas intracelulares. Análisis del ciclo celular y la proliferación. Análisis de la muerte celular: Apoptosis/necrosis. Análisis funcional: expresión de RNA, actividades metabólicas, funcionalidad mitocondrial, estrés oxidativo. Citometría en tiempo real. Análisis de microorganismos. Análisis de micropartículas.
6.ANÁLISIS, INTERPRETACIÓN Y MANEJO DE DATOS. Análisis de resultados con software propio de los citómetros, software comercial con licencia de uso y software de dominio público. Detección de problemas y aplicación de soluciones.
Citometria de flux: fonaments i aplicacions
