Descripción
Objetivos
El objetivo principal del curso es ofrecer una formación eminentemente experimental de manera que el alumno consiga una alta capacitación práctica en la GC y HPLC.
Dirigido a
Este curso está especialmente indicado para recién licenciados e ingenieros de las ramas científicas que quieran adquirir experiencia práctica, además de los profesionales activos que deseen reciclarse en estas técnicas cromatográficas.
Temario
Temario
INTRODUCCIÓN A LA CROMATOGRAFÍA
Introducción histórica y conceptos generales
Parámetros cromatográficos
Teoría de la separación cromatográfica
Técnicas cromatográficas:
- Cromatografía Plana o Cromatografía en capa fina (CCF o TLC)
- Cromatografía de gases (CG)
- Cromatografía Líquida de alta resolución (HPLC)
Tipos de cromatografías
CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA DE ALTA RESOLUCIÓN (HPLC)
Instrumentación
·,Sistema de bombeo
·,Inyector
·,Horno de columna
·,Columnas y fase estacionaria
* Material de base
-Base sílice
-Base polimérica
*Partículas de relleno
*Composición química
*Dimensiones
*Aspectos básicos de las columnas
·,Fase móvil
* Mecanismos de separación
-Adsorción
-Partición
-Intercambio iónico
-Exclusión molecular
* Conservación
·,Detector
* Tipos de detectores
-Detector UV-Vis
-Detector de fluorescencia
-Detector de Índice de Refracción (RID)
-Detector conductimétrico
-Detector de ELCD (Evaporative Light Scattering)
-Detector espectrómetro de masas (MS)
Cualificación del sistema cromatográfico de HPLC
·,Cualificación del diseño (DQ)
* Cualificación de la instalación (IQ)
* Cualificación de la operación (OQ)
* Cualificación del funcionamiento (PQ)
Adquisición y tratamiento de datos
·,Tratamiento de la información
·,Tratamiento de la señal cromatográfica: integración
Análisis cualitativo
Análisis cuantitativo
·,Métodos de cuantificación relativos
* Normalización
* Normalización corregida
·,Métodos de cuantificación absolutos
* Patrón externo
* Patrón interno
* Adición estándar
Desarrollo de métodos de análisis en HPLC
·,Objetivos de la separación
·,Pretratamiento de muestra
·,Selección método de detección
·,Selección método cromatográfico
·,Ensayos previos
·,Optimización de la separación cromatográfica
·,Métodos de cuantificación relativos
·,Cálculos
·,Estimación de fiabilidad de los resultados
·,Desarrollo de métodos de HPLC en fase reversa
Troubleshooting
Prácticas:
·,Cualificación operacional de un equipo de HPLC
·,Análisis cualitativo y cuantitativo de una familia de conservantes en crema
·,Análisis cualitativo y cuantitativo de alcaloides en alimentos
·,Influencia del pH en el análisis cualitativo y cuantitativo de conservantes en alimentos
·,Desarrollo de métodos de análisis (simulación)
·,Determinación de Principio Activo Farmacéutico en un producto farmacéutico
CROMATOGRAFÍA PLANA
Principios fundamentales de la cromatografía plana
Principales aplicaciones (o campos de aplicación)
Desarrollo de métodos de separación
Técnicas avanzadas en cromatografía plana
Cromatografía en capa fina de alta resolución (HPTLC)
Troubleshooting
Aplicación de la técnica según Farmacopea Europea
Prácticas:
·,Desarrollo de métodos de separación
·,Estudio de la separación de isómeros posicionales
·,Estudio del Límite de Detección de compuestos en CCF
·,Estudio de preparación y uso de reveladores para CCF
·,Desarrollo de métodos para separación de Principios Activos Farmacéuticos
CROMATOGRAFÍA DE GASES
Principios generales de la cromatografía de gases
Instrumentación
- Inyector
-Inyector de vaporización
-Inyector on column
-Inyección split/ splitless
-Inyección por vaporización a temperatura programada (PTV)
-Inyector headspace
-Séptums
-Férulas
-Jeringas
-Mantenimiento del inyector
- Horno de columna
- Columnas
-Columnas de relleno
-Columnas capilares
-Absorbentes
-Fase estacionaria
- Detector
-Clasificación
-Tipos de detectores y sus aplicaciones
Detector de Ionización de llama (FID)
Detector de conductividad térmica (TCD)
Detector de captura de electrones (ECD)
Detector de ionización termoiónico (nitrógeno/fósforo) (NPD)
Detector fotométrico de llama (FPD)
Detector espectrómetro de masas (MS)
Detector de fotoionización (PID)
Detector de emisión atómica (AED)
Detector de quimiluminiscencia
Otros
- Gases para GC
- Control de la temperatura
- Cualificación del sistema cromatográfico de GC
- Cualificación del diseño (DQ)
- Cualificación de la instalación (IQ)
- Cualificación de la operación (OQ)
- Cualificación del funcionamiento (PQ)
Tratamiento de datos
- Cualificación del diseño (DQ)
Análisis cualitativo
- Identificación
- Cálculo del índice de Kovats
- Metodología
Análisis cuantitativo
- Métodos de cuantificación relativos
-Normalización
-Normalización corregida
- Métodos de cuantificación absolutos
-Patrón externo
-Patrón interno
-Adición estándar
Tratamiento de datos
Preparación de muestras para análisis por GC
- Extracción
-De matrices gaseosas
-De matrices líquidas
-De matrices sólidas
- Purificación
- Derivatización
Desarrollo de métodos de análisis en GC
- Objetivos de la separación
- Concentración de analito
- Muestreo y pretratamiento de muestra
- Selección temperatura y modo de inyección
- Selección gas portador
- Selección columna y fase estacionaria
- Selección temperaturas del horno
Troubleshooting
Aplicaciones de la Cromatografía de gases
Ejemplos
Prácticas:
- Desarrollo de métodos de análisis (simulación)
- Módulos y componentes del cromatógrafo de gases
- Desarrollo de método de análisis cualitativo para una mezcla de hidrocarburos aromáticos
- Análisis cuantitativo de un precursor de PVC por el método de patrón interno
- Optimización de parámetros de inyección: modo split/splitless y tiempo de splitless
- Optimización de parámetros de inyección: análisis por headspace de componentes de una bebida alcohólica
VALIDACIÓN DE MÉTODOS CROMATOGRÁFICOS
Definición
Consideraciones básicas
- Conceptos básicos
- Normativa: ICH, USP EP, etc.
Parámetros de validación y criterios de aceptación
- Especificidad
- Linealidad
- Precisión
-Repetibilidad
-Precisión intermedia
-Reproducibilidad
- Exactitud
- Rango
- Límite de detección
- Límite de cuantificación
- Robustez
- Idoneidad del sistema
Revalidación al modificar métodos previamente validados: criterios de las farmacopeas
Ejemplos
CONFERENCIAS
Impartidas por especialistas de la industria y de centros de investigación, relacionadas en general con el mundo de la cromatografía. Se realizan 2 sesiones por curso.
